Введение. Одной из актуальных задач на сегодняшний день является необходимость мониторирования ведущей микрофлоры при различных формах остеомиелита с выявлением не только устойчивых штаммов, но и препаратов, применение которых перестало быть эффективным. Цель. Мониторинг ведущей грамотрицательной микрофлоры при остеомиелите и анализ антибиотикорезистентности выделенных штаммов за трехлетний период. Результаты и обсуждение. В спектре грамотрицательной микрофлоры в период 2017–2019 гг. лидером по частоте встречаемости были штаммы P. aeruginosa. Количество изолятов снизилось на,6 % по сравнению с 2017 годом. Далее следовали бактерии Enterobacter sp., Acinetobacter sp., Klebsiella sp. В 2019 году в два раза увеличилось число выделенных штаммов K. pneumoniae. При анализе антибиотикограмм обращает на себя внимание мультирезистентность штаммов Acinetobacter sp., хотя, в сравнении с 2017 и 2018 годами общее число устойчивых штаммов снизилось. Среди прочих неферментирующих грамотрицательных бактерий увеличилось в 5,4 раза число резистентных к имипенему штаммов. Эффективность остальных тестируемых препаратов также снизилась. В отношении клинических изолятов семейства Enterobacteriaceae наблюдается нарастающая устойчивость к бета-лактамным антибиотикам, в том числе и к ингибиторозамещенным. Наиболее эффективным препаратом является меропенем, хотя число устойчивых штаммов значительно выросло по сравнению с предыдущими годами. Штаммы Klebsiella sp. характеризовались высокой устойчивостью ко всем тестируемым антибиотикам. Заключение. Изменение видового состава в структуре грамотрицательных микроорганизмов при остеомиелите, а также появление устойчивых штаммов к применяемым в клинике препаратам, вызывают необходимость постоянного мониторирования и отслеживания мультирезистентных клинических изолятов с целью корректировки эмпирической антибиотикотерапии.